血液检验标本采集方法

  1. 血液检验标本采集方法   血液检验标本分为全血、血浆、血清等。全血标本主要用于临床血液学检查,例如血细胞计数和分类、形态学检查等;血浆标本适合内分泌激素、血栓和止血检测血清标本多适合于临床化学和免疫学的检测。

按照血标本采集部位的不同,分为静脉血、动脉血和毛细血管血三种。绝大多数检查采用静脉血,少数检查如血气分析、乳酸和丙酮酸测定等需要采集动脉血,毛细血管血主要用于各种微量法检查或大规模普查。

静脉血是*常用的实验室检查标本,真空采血法是**的静脉血采集技术。基本原理是双向针的一端插入真空试管内,另一端在持针器的帮助下刺入静脉,血液在负压作用下自动流入试管内。由于在完全封闭状态下采血,避免了血液外溢引起的污染,并有利于标本的转运和保存。标准真空采血管采用国际通用的头盖和标签颜色显示采血管内添加剂种类和检测用途,可根据需要选择相应的盛血试管。

1.1 静脉血采集方法、注意事项和采集样品所用材料的安全处置:

1)止血带或压脉器:采集静脉血时,止血带压迫静脉时间不宜过长,以不超过 40秒为宜,否则容易引起淤血、静脉扩张,并且影响某些指标的检查结果,如乳酸升高、pH 值降低、K+、Ca2+、肌酸激酶升高等。

2)采血时间与部位:大多数化验检查要求清晨、空腹、采集静脉血应尽可能避免在输液同时取血,输液不仅使血液稀释,而且对实验室检查结果发生严重干扰,特别是血糖和电解质。

3)避免溶血、杂质污染:采血器具必须无菌、干燥、洁净.避免特别用力抽吸和推注、避免化学污染和细菌污染引起的溶血。因为红细胞的某些成分与血清(浆)不同,样本溶血可使红细胞某些成分释放,影响实验室检查结果。

4)血样的采集:血样要求在每一天的同一时间采集,理想的时间是早晨 7:00到 8:00,尤其是监测为目的时,更要保证标本采集时间的统一。*后一次食物和液体摄入应在前一天下午 6:00 到7:00 (急诊检验例外)。

血样采集应在不服药期间,如在早晨服药前。血样采集时,患者应仰卧位,采血点应在同一静脉区,通常为手臂静脉。

5)标本采集后须立即送检,放置过久影响检验结果。当取血不顺利时,切忌在同一处反复穿刺,易导致标本溶血或有小凝块,影响检测结果。

6)采集血培养标本时应先注射厌氧瓶,尽量减少接触空气时间。

7)微量元素测定采集标本的注射器和容器不能含游离金属。

8)采集样品所用材料的安全处置:

使用后的采血针、注射器针头等锐器物应当直接放入不能刺穿的利器盒内或毁型器内进行安全处置,禁止对使用后的一次性针头复帽,禁止用手直接接触使用过的针头、刀片等锐器

物注射器针筒、棉签等其他医疗废物放入黄色医疗废物袋中,医疗废物和生活垃圾分类收集存放。消毒毁形后的医疗废物必须交给指定的医疗废物处理厂,不得擅自废弃。

1.2 临床化学/免疫检验标本

临床化学/免疫检验多用非抗凝血标本,**使用真空负压采血管。

标本采集主要注意事项有:

1)化学项目大多数需要空腹采静脉血,多个单项化学检测项目组合检验时一般可采l管血;

2)采血量视检查项目多少不同而异,通常为4.0~5.0ml;

3)多个组合检测项目同时采血时应按下列顺序采血:

血培养→无添加剂管→凝血管→有添加剂管

有添加剂管的顺序为:橼酸盐管→肝素管→EDTA管→草酸盐/氟化钠管

4)不论是抗凝血还是非抗凝血,为了缩短血清或血浆与血细胞的接触时间,血液标本收集后,须尽可能早地将血清或血浆从全血中分离出来,避免由此而影响检验结果的准确性。从血液标本采集开始,必须在2h内将全血处理为血清或血浆。

①血清(非抗凝血):采血后标本于22~25℃(室温)15~30min后可自行(自发)完全凝固,禁用木棍和玻棒等剥离凝块冷藏标本凝集较慢,加促凝剂者凝集加快。

②血浆(抗凝血):应采用抗凝管采血,采血后立即颠倒混合5~10次,采血后数分钟内可离心分离血浆。

③冷藏标本:用于稳定血液中温度依赖性成分(抑制细胞代谢)的检测项目,标本于 2~8℃冷藏(标本采集后立即置于冰箱中,冷藏必须充分);标本需冷藏的测定项目有:儿茶酚胺、胃泌素、甲旁素、PH/血气、NH3、乳酸、丙酮酸等。全血标本一般不冷藏,血钾测定标本冷藏不得>2h。全血标本切忌冷冻。

④代谢抑制剂和防腐剂的应用:用于抑制细胞代谢。血标本中加入氟化钠后,血细胞未分离情况下血标本中葡萄糖(Glu),22~25℃稳定24h.2~8℃稳定48h;氟化钠不适用于新生儿及儿童的Glu测定(因儿童PCV高,细胞糖酵解难以控制);氟化钠一麝香草酚混合剂不适合酶学检测(因氟化钠一麝香草酚混合剂抑制酶活性));甲醛草酸钾抗凝保存剂不适用于血糖测定。

1.3 红细胞沉降率(血沉,ESR)检测标本

静脉采集枸橼酸钠(109mmol/L,即32.06g/L)抗凝血(枸橼酸钠抗凝管采血),黑帽管。

采血注意事项:

1)单独采1管血,准备采血至2ml刻度线(抗凝剂:全血=1:4);

2)采血后立即上下颠倒混合5~10 次;

3)采血后应尽快送检(必须 2h内检测)。

1.4   血常规(全血细胞分析)检验标本

一般用EDTA 1.5~2.2mg/ml抗凝(EDTA抗凝采血管-紫帽管)。

采血注意事项:

1)采血后立即上下颠倒混匀,5~10次.不可用力震荡;

2)应按抗凝管刻度采血至2ml,可不用空腹;

3)采血后应尽快送检(需显微镜观察形态的标本采血后应及时推片固定,因为超过2小时WBC形态会发生改变);

4)血型与血常规可采1管血。

1.5   75克葡萄糖耐量试验(OGTT)/胰岛素释放试验/C-肽释放试验

1)病人准备:试验前3日,每日进食碳水化合物量不低于 250-300 克,且维持正常活动,影响试验的药物(如:咖啡因、口服避孕药、水杨酸盐等)应在3 日前停用,试验前病人应 10~16小时不进食。

2)标本采集:临床上常用方法是清晨抽空腹血后,口服75 克葡萄糖,再于给糖后 0.5、1、2、3 小时各采血2ml /1次(共5次)。

3)标本保存:采血后1小时内分离血清并及时冷藏送检或采用血糖专用抗凝管采血,于 2~8℃保存。

1.6    高血压系列检验标本

1)高血压三项(肾素、血管紧张素I、II)

①病人准备:β-阻断剂、血管扩张剂、利尿剂及甾体激素、甘草等影响体内肾素水平,一般要在停药后2周测定肾素活性(PRA),利血平等代谢慢的药物应在停药 3 周测定。不宜停药的病人改服胍乙啶等影响PRA较小的降压药。钠摄入量影响机体 PRA 水平,故病人测定 PRA 前 3 天应适当减少食盐摄入量,**同时测定取血前24小时尿钠含量,以供分析PRA结果时参考;

②标本采集:静脉取血 4~5ml,拔除针头后缓慢注入到专用抗凝管中,盖好管塞后上下颠倒 5 次,混匀后 2500 转/分,离心 5~10 分钟,分离血浆,将血浆装入专用血浆管后低温送检。如不能立即送检,需尽快冰冻保存(-15℃)。溶血标本不能检测;

③标本类型、标本量:专用抗凝管采血,分离血浆,取 2ml送检;

④标本保存:低温冰箱保存(-15℃以下),可保存 2 个月;

⑤注意事项:申请单上应注明抽血时的体位(卧位:病人在早上 6-8时起床前,取静脉血;立位:病人起床后活动 3小时,取静脉血。)和饮食情况(普食饮食、低钠饮食);标本未及时分离血浆、反复冻融、溶血、保存不当、使用过期抗凝管等均可使结果受到影响。

2)醛固酮

①病人准备:留样前应停服利尿剂至少 3 周,停服抗高血压药物 1 周;

②标本采集:血浆醛固酮测定应采用肝素抗凝,采集后立即分离血浆,置-20℃保存待测;尿液标本则留取24小时尿量,用10~15mL浓盐酸防腐;

③申请单上注明:抽血时的体位(卧位、立位)和饮食情况(普食饮食、低钠饮食);尿液标本要准确记录24小时尿量。

1.7     皮质醇标本采集及注意事项

正常人皮质醇的分泌存在昼夜节律,一般为早上 8 点或下午 4 点采血,送检时请务必在申请单上注明采血时间。

1.8      T细胞亚群标本采集及注意事项

1)标本类型:必须用肝素钠抗凝血。

2)标本量:2ml。

3)该项目在不同年龄段的参考值不尽相同,所以送检时请务必在申请单上注明病人年龄。

1.9    微量元素检测标本采集要求     1)采血时不能戴乳胶手套(对锌有污染),可使用“PE”(塑料)手套(或不戴手套把手洗干净) 。

2)橡皮塞对锌有污染,故普通采血管不可使用,建议使用本所提供的专用管 (专用管有三种,贴红标签管为铅、硒专用管,即全血管,内有肝素;贴蓝标签管为血浆分离管,内有肝素;贴黄标签管为锌铜铁钙镁专用管,即血浆管)。

3)使用专用管前,请检查红、蓝色标签管中是否有肝素(液体或白色晶体粉末),开盖前请轻磕管底,将盖子上吸附的肝素弹下。

4)采集方法:采静脉血 2.5~3mL,将 0.5mL 血液注入全血管(红标签管),粘上条形码,用于血铅和血硒的检测;将剩余2.0~2.5mL血液注入血浆分离管(蓝标签管),立即轻轻颠倒混匀,以2000r/min离心5分钟,再吸取血浆(约 1mL)至血浆管(黄标签管),粘上条形码,用于检测锌铜铁钙镁;*后将全血管(红标签管)和血浆管(黄标签管)装入自封袋送检。

5)如不能及时送检,应放置2-8℃冰箱保存。

6)溶血对结果影响较大,应尽量避免。若血浆为溶血标本,视为不合格标本。

     1.10遗传学检测标本采集要求

1)标本采集:外周血标本可使用中心配送的肝素抗凝管(遗传专用)和采血针进行采集,采集后立即将试管轻轻颠倒混匀,以免凝血;脐带血标本、骨髓标本可以在穿刺成功后,打开中心配送的肝素抗凝管盖,将脐带血或骨髓注入采集管中,立即将试管轻轻颠倒混匀,以免凝血,请注意无菌操作,不要污染管盖。胸腹水标本可在采集后注入废弃生理盐水注射液瓶中,并用75U/ml的肝素抗凝。请避免使用注射器采集标本后直接注入采集管的方式进行标本采集,以免引起溶血;请勿使用EDTA等抗凝管采集标本。

2)标本量:外周血、脐带血、骨髓各4ml;胸腹水100ml。

3)标本送检:合格标本须于采血后当天送至遗传实验室,故请于标本采集后及时通知九州医检工作人员接收标本;标本有溶血、凝血现象,也视为不合格标本。骨髓标本应尽快送至实验室。

4)标本保存:标本采集后置于18~25℃保存,不可冷冻,不可放置于高温环境中。 5申请单填写:请完整填写申请单,尤其是标本采集时间、性别、病史、临床诊断等。

1.11    基因检测标本采集要求

1)所有用于基因诊断的标本必须用无菌试管或容器留取,严禁使用肝素抗凝管,采集标本时注意无菌操作。

2)为避免污染,送检基因诊断标本项目需单人单项目单管。

3)采集方法:

①血液标本

抽取病人静脉血,置无菌试管中室温自然凝固或 2000 转/分离心,取分离出的血清置2~8℃保存,不超过24小时,等待艾迪康工作人员接收;血清标本不宜反复冻融;

②女性分泌物标本

a.分泌物标本采样应在非月经期进行;采样前 3 天内不使用阴道内药物,不冲洗阴道;24小时内不应有性行为;

b.采集时先用棉签将宫颈口或尿道口过多的分泌物轻轻擦去,更换棉拭子,将棉拭子伸入宫颈,通过上皮交界处,旋转 3~5 周,以保证取得较多的柱状上皮标本,对于怀疑 HPV 感染的患者,尽量采集病变部位标本,可提高HPV的检出率。将取样后的棉拭子放入配套的软管中,旋紧管盖;

c.男性分泌物标本:先清洁尿道口,将棉拭子伸入男性尿道25px,旋转 3~5 次获得标本,将取样后的棉拭子放入配套的软管中,旋紧管盖;

d.疱疹液或疣体标本:对于生殖器或肛周有疣状体增生,怀疑为尖锐湿疣者,采集疣体表面脱落细胞。用生理盐水润湿棉拭子,用力来回擦拭疣状组织表面三次,取得脱落细胞。将取样后的棉拭子放入配套的软管中,旋紧管盖。

1.12    骨髓检查的要求和注意事项

1)涂片要求:二张血片,六张骨髓片,怀疑白血病则需八张骨髓片。骨髓血片注明“B”,骨髓片注明“M”,以示区别。

2)申请单注意事项:

①病例摘要:应填写全面,尤其是肝、脾、淋巴结、出血状况等与血液病相关的症状以及药物的应用等均应填写清楚;

②化验结果:血常规结果一定不能缺,如果可能,MCV、MCH、MCHC及分类也一并填上;

③采取骨髓部位也应填上,如果采取骨髓时不顺,应重抽,以免耽误病人;

④写上主治医生联系方式,如科室电话、手机号码等(以便与临床密切联系)。